细胞背景

AN3 CA细胞建系于1964年，它衍生于子宫内膜癌患者的淋巴结转移组织；AN3 CA细胞具有癌细胞的基本特性，能在体外长期传代培养；AN3 CA细胞接种实验动物产生明显肿瘤。但AN3 CA细胞的生物学特性及超微结构尚未深入研究，仅发现该细胞系促黑激素合成为阴性；AN3 CA细胞常用于人子宫内膜癌细胞生物学及其相关特性研究。

细胞信息

• 细胞名称：AN3 CA（人子宫内膜腺癌细胞）(STR鉴定正确)
• 细胞别称：AN3 CA;AN3 Ca;AN3CA;AN-3;AN3, AN3-CA
• 种属：人
• 形态特性：上皮细胞样
• 生长特性：贴壁生长
• 组织来源：子宫，子宫内膜
• 肿瘤类型：子宫内膜癌细胞

培养条件

• 培养基: MEM+10% FBS+1%P/S
• 培养温度：37℃
• 气体环境：95%空气，5%CO₂。
• 培养箱湿度：70% - 80%。
• 传代比例：1:3-1:4
• 换液频次：2-3次/周
• STR位点:Amelogenin：X;CSF1PO：12,14;D2S1338：20,23;D3S1358：17;D5S818：11,14;D7S820：7,7.1,10;D8S1179：12,14;D13S317：12,14;D16S539：10,14;D18S51：15,18;D19S433：14;D21S11：29,30;FGA：23;Penta D：9,11;Penta E：9,16;TH01：9.3,10;TPOX：8,10;vWA：14,20

细胞操作

• 细胞复苏：

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，2000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。

• 细胞传代：

1.当细胞汇合度达 80%，即可进行传代培养。

2.弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。

3.加 1-2 mL消化液（0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温或者37 ℃消化 1-2 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，2000 rpm 离心5 min弃去上清液。

4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:3-1:4 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。