细胞介绍
H9c2(2-1)细胞是一株由Kimes·B和Brandt·B从BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆得到的细胞株;H9c2(2-1)细胞表现出许多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)细胞中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%,H9c2(2-1)细胞融合发生得很快。
细胞信息
- 细胞名称:H9c2(2-1)(大鼠心肌细胞)(STR鉴定正确)
- 细胞别称:H9c2 (2-1);H9c2;H9C2
- 种属:小鼠
- 形态特性:成肌细胞样
- 生长特性:贴壁生长
- 组织来源:心肌
- 肿瘤类型:自发永生化细胞
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培养条件
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 培养温度:37℃。
- 气体环境:95%空气,5%CO₂。
- 培养箱湿度:70% - 80%。
- 传代比例:1:2-1:4
- 换液频次:2-3次/周
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细胞操作
提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液,放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出,迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中,轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中,2000rpm 离心5分钟,弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液,用滴管轻轻吹打成单细胞悬液,避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。
1.当细胞汇合度达 80%,即可进行传代培养。
2.弃去旧培养基,用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3.加 1-2 mL消化液(0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA)于培养瓶中,常温或者37 ℃消化 1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,轻轻吹打成单细胞悬液,2000 rpm 离心5 min弃去上清液。
4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按 1:2-1:4 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。