细胞背景
Sp2/0-Ag14细胞是由绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞和P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合得到的。Sp2/0-Ag14细胞不分泌免疫球蛋白,对20 μg/mL的8-氮鸟嘌呤有抗性,对HAT比较敏感;Sp2/0-Ag14细胞可以作为细胞融合时的B细胞组分用于制备杂交瘤;鼠痘病毒阴性。
细胞信息
- 细胞名称:Sp2/0-Ag14[SP2/0](小鼠骨髓瘤细胞)(STR鉴定正确)
- 细胞别称:SP2/0-Ag14;SP2/0-AG14;SP2/0-ag14;Sp2/O-Ag14;SP2/O-Ag14;Sp2/0-Ag-14;SP2-0-Ag14;SP2/0 Ag-14;SP-2/0-AG14;Sp 2/0-Ag 14;Sp2/0;SP2/0;Sp2/O;SP2/O;SP-2;SP2;GM03569;GM03569B;GM3569
- 种属:小鼠(B细胞),小鼠(骨髓瘤细胞)
- 形态特性:淋巴母细胞样
- 生长特性:悬浮细胞
- 细胞来源:脾脏
- 细胞类型:肿瘤细胞
- 肿瘤类型:骨髓瘤细胞
培养条件
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 培养温度:37℃。
- 气体环境:95%空气,5%CO₂。
- 培养箱湿度:70% - 80%。
- 传代比例:3×10⁵-5×10⁵ cells/mL
- 换液频次:2-3次/周
细胞操作
提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液,放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出,迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中,轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中,2000rpm 离心5分钟,弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液,用滴管轻轻吹打成单细胞悬液,避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。
- 此细胞为悬浮细胞,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL可以维持细胞的正常生长。
- 此细胞为悬浮细胞,传代时需收集细胞悬液到15ml离心管中2000rmp离心5min后,倒掉上清液,加入5-6ml新鲜的培养基重悬细胞,将细胞悬液按 1:2到 1:5的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。