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小鼠小肠内分泌细胞(STC-1)

套装:5支冻存细胞+5支Biorabbit™清洗液+5支Biorabbit™复苏培养液/盒

提供:无支报告STR

货号 规格 纯度
MS025 2*10^6cells/支 5支/盒

产品基本信息

细胞背景: Douglas Hanahan, PhD Cold Spring Harbor Laboratory 博士于 1990 年建立的来源于 RIP1Tag2 / Rip2pyST1 双转基因 C57B1/6J, 周龄 10 至 13 周小鼠的肠道肿瘤。人类肠道神经内分泌肿瘤的有用模型,也是研究激素促胰液素的有用工具。携带将大鼠胰岛素启动子(RIP)与多瘤小 T(PyST) 抗原连接的杂交基因的转基因小鼠与携带与 SV40 早期区域(Tag)相连的大鼠胰岛素启动子(RIP) 的转基因小鼠交配,产生携带两种转基因(双转基因)的后代。发现这些小鼠除了胰腺β细胞肿 瘤外还具有频繁的肠道肿瘤。基因表达研究表明,肠道和胰腺肿瘤是作为独立的实体出现的。 STC-1 细胞系产生激素促胰液素。

细胞信息

  • 细胞名称:STC-1 小鼠小肠内分泌细胞 (STR鉴定正确)
  • 种属:小鼠
  • 形态特性:上皮样细胞。
  • 生长特性:贴壁生长

培养条件

  • 培养基:DMEM+10% FBS1% P/S 
  • 培养温度:37℃。
  • 气体环境:95%空气,5%CO₂。
  • 培养箱湿度:70% - 80%。
  • 传代比例:1:2-1:5
  • 换液频次:2-3次/周

存储条件

液氮

使用方法

细胞操作

  • 细胞复苏

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液,放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出,迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中,轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中,2000rpm 离心5分钟,弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液,用滴管轻轻吹打成单细胞悬液,避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。

  • 细胞传代

1.当细胞汇合度达 80-90%,即可进行传代培养。

2.弃去旧培养基,用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。

3.加 1-2 mL消化液(0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA)于培养瓶中,常温或者37 ℃消化 1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,轻轻吹打成单细胞悬液,2000 rpm 离心5 min弃去上清液。

4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基,首次传代建议按1:2传代,后续培养可按 1:2 到 1:5的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。

注意事项

冻存细胞收货后处理方法:

  1. 收到细胞后,首先观察泡沫箱中干冰是否有剩余,冻存管是否完好,是否有解冻情况。若发现干冰完全汽化或冻存管有解冻现象,请及时拍照并与我们联系。如果细胞签收三天内未与我们联系,则默认为收货良好。
  2. 细胞在液氮中可长期保存;-80 ℃保存不要超过一个月,长期在-80 ℃可能会导致细胞活率下降。
  3. 复苏第一管细胞后,如有活性、状态问题及时与我们联系。
  4. 注意事项1.该细胞贴壁不牢固,容易脱落。复苏活细胞的时候往往会因为这个特性细胞脱落甚至聚团成球,因此需要技术人员收集所有细胞,包含细胞团后分散开,可以使用胰酶消化配合巴氏吸管轻轻的吹散开后重新铺,等细胞稳定后开始增值。

    2.复苏细胞运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

    3.复苏细胞常温发货:收到后 T25 瓶消毒再放置培养箱静置 2-3 小时后观察密度和状态拍照 2-3 张反馈给销售,密度达标就可以传代。前期传代比例 1:2,等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成 1个1ml 冻存管,另外一瓶继续传代,反复冻存 2-3 只后才扩增做实验,以防突发情况引起断种。

  5. 细胞复苏请使用套装内的复苏液和清洗液,传代可尝试其他血清或培养基。

  6. 收到细胞后存放于-80超低温冰箱内,一天后转移到液氮中长期保存。

  7. 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

    5.建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

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