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人静脉内皮细胞(永生化)

套装:5支冻存细胞+5支Biorabbit™清洗液+5支Biorabbit™复苏培养液/盒

提供:无支报告STR

货号 规格 纯度
MN001 2*10^6cells/支 5支/盒

产品基本信息

人脐静脉内皮细胞分离自脐带组织;它是脐静脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO₂和O₂,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O₂和营养物质从胎盘运送给胎儿。

细胞信息

  • 细胞名称:HUVEC (人脐静脉内皮细胞)(STR鉴定正确)
  • 细胞别称:HUVECs
  • 种属:人
  • 形态特性:内皮细胞样
  • 生长特性:贴壁细胞
  • 组织来源:脐带组织

培养条件

  • 培养基:人脐静脉内皮细胞专用培养基(含FBS,生长添加剂,penicillin,streptomicin)
  • 包被条件:PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%)
  • 培养温度:37℃
  • 气体环境:95%空气,5%CO₂
  • 培养箱湿度:70% - 80%
  • 传代比例:1:2
  • 传代特性:可传3-5代,3代状态最佳
  • 换液频次:2-3次/周

存储条件

液氮

使用方法

  • 细胞复苏

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液,放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出,迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中,轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中,2000rpm 离心5分钟,弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液,用滴管轻轻吹打成单细胞悬液,避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。

  • 细胞传代

1.当细胞汇合度达 80-90%,即可进行传代培养。

2.弃去旧培养基,用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。

3.加 1-2 mL消化液(0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA)于培养瓶中,常温或者37 ℃消化 1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,轻轻吹打成单细胞悬液,2000 rpm 离心5 min弃去上清液。

4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按 1:2 到 1:4的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。

注意事项

冻存细胞收货后处理方法:

  1. 收到细胞后,首先观察泡沫箱中干冰是否有剩余,冻存管是否完好,是否有解冻情况。若发现干冰完全汽化或冻存管有解冻现象,请及时拍照并与我们联系。如果细胞签收三天内未与我们联系,则默认为收货良好。
  2. 细胞在液氮中可长期保存;-80 ℃保存不要超过一个月,长期在-80 ℃可能会导致细胞活率下降。
  3. 复苏第一管细胞后,如有活性、状态问题及时与我们联系。
  4. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  5. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。
  6. 人脐静脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
  7. 胰酶终止消化要用含10%血清的完全培养基(DMEM+10%FBS),原代内皮细胞培养体系不能用来终止消化,血清含量不到10%,就是1ml胰酶 然后加5 ml10%血清的完全培养基(DMEM+10%FBS)终止
  8. 细胞复苏请使用套装内的复苏液和清洗液,传代可尝试其他血清或培养基。

  9. 收到细胞后存放于-80超低温冰箱内,一天后转移到液氮中长期保存。