人脐静脉内皮细胞分离自脐带组织;它是脐静脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO₂和O₂,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O₂和营养物质从胎盘运送给胎儿。
细胞信息
- 细胞名称:HUVEC (人脐静脉内皮细胞)(STR鉴定正确)
- 细胞别称:HUVECs
- 种属:人
- 形态特性:内皮细胞样
- 生长特性:贴壁细胞
- 组织来源:脐带组织
培养条件
- 培养基:人脐静脉内皮细胞专用培养基(含FBS,生长添加剂,penicillin,streptomicin)
- 包被条件:PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%)
- 培养温度:37℃
- 气体环境:95%空气,5%CO₂
- 培养箱湿度:70% - 80%
- 传代比例:1:2
- 传代特性:可传3-5代,3代状态最佳
- 换液频次:2-3次/周
提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液,放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出,迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中,轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中,2000rpm 离心5分钟,弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液,用滴管轻轻吹打成单细胞悬液,避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。
1.当细胞汇合度达 80-90%,即可进行传代培养。
2.弃去旧培养基,用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3.加 1-2 mL消化液(0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA)于培养瓶中,常温或者37 ℃消化 1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,轻轻吹打成单细胞悬液,2000 rpm 离心5 min弃去上清液。
4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按 1:2 到 1:4的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。