细胞背景

SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞株是于1972年11月从一位多次化疗及放疗的扩散性神经母细胞瘤患儿骨髓穿刺物中建立的；SK-N-BE(2)细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。有报道称，SK-N-BE(2)细胞的饱和浓度超过1×10⁶细胞/cm²。SK-N-BE(2)细胞形态多样，有的有长突触、有的呈上皮细胞样；SK-N-BE(2)细胞会聚集，形成团块并浮起。

细胞信息

• 细胞名称：SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞) (STR鉴定正确)
• 细胞别称：SK-N-BE2;SKNBE(2);SKNBE-2;SKNBE2;SK-N-BE;SKNBE
• 种属：人
• 生长特性：半贴壁半悬浮
• 形态特性：神经母细胞样
• 组织来源：脑；神经母细胞瘤，骨髓转移灶
• 细胞类型：肿瘤细胞
• 肿瘤类型：神经母细胞瘤细胞 

培养条件

• 培养基：MEM/F12＋10% FBS＋1% P/S 
• 培养温度：37℃。
• 气体环境：95%空气，5%CO₂。
• 培养箱湿度：70% - 80%。
• 传代比例：1:3-1:4
• 换液频次：2-3次/周
• STR: Amelogenin：X,Y；CSF1PO：10,10；D12S391：18,24；D13S317：11,11；D16S539：9,11；D18S51：16,16；D19S433：12,13；D21S11：30,32.2；D2S1338：17,23；D3S1358：19,19；D5S818：12,12；D6S1043：11,19；D7S820：9,10；D8S1179：13,14；FGA：22,25；Penta E：14,18；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；

细胞操作

• 细胞复苏：

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，2000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。

• 细胞传代：

1.当细胞汇合度达 80-90%，即可进行传代培养。

2.弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。

3.加 1-2 mL消化液（0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温或者37 ℃消化 1-2 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，2000 rpm 离心5 min弃去上清液。

4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:3 到 1:8的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。