细胞简介:
源自人肺腺癌,该肺组织仍处于分化状态。PC-9(以前称为PC-14)。PC-14 最初于1989年作为源自人肺腺癌(未分化型)的细胞系存放在RIKEN生物资源中心。该生物资源中心通过短串联重复序列 (STR) DNA分析发现该细胞系与 PC-9 相同,PC-9是源自人肺腺癌(分化型)的细胞系。此错误识别发生在细胞系存放在RIKEN生物资源中心之前。细胞系的名称更改为PC-9,以反映这一发现。
细胞信息
- 细胞名称:PC-9(人肺癌细胞)(STR鉴定正确)
- 种属:人
- 形态特性:圆形和纺锤形混合
- 生长特性:贴壁生长,少量悬浮
- 细胞类型:肿瘤细胞
- 肿瘤类型:肺癌细胞
培养条件
- 培养基:RPMI1640+10% FBS+1% P/S
- 培养温度:37℃。
- 气体环境:95%空气,5%CO₂。
- 培养箱湿度:70% - 80%。
- 传代比例:1:3-1:5
- 换液频次:2-3次/周
细胞操作
提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液,放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出,迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中,轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中,2000rpm 离心5分钟,弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液,用滴管轻轻吹打成单细胞悬液,避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。
1.当细胞汇合度达 80-90%,即可进行传代培养。
2.弃去旧培养基,用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3.加 1-2 mL消化液(0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA)于培养瓶中,常温或者37 ℃消化 1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,轻轻吹打成单细胞悬液,2000 rpm 离心5 min弃去上清液。
4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按 1:3 到 1:5的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。