细胞背景
WM115细胞是一种具有转移能力的致瘤性（VGP）原发性黑色素瘤细胞系。该细胞系是从一名患有浅表性黑色素瘤的55岁女性的转移部位（右前腿）建立的。受试者显示VGP，具有厚度2.24mm的Clark III级肿瘤。该细胞系在BRAF基因的密码子600处具有特异性V600D（Val600Asp）突变。该细胞系还表达PTEN功能丧失，包括半合子缺失。该细胞系来源于与细胞系WM239A、WM165-1和WM266-4相同的患者。WM115细胞系来源于原发性肿瘤，WM239A、WM165-1和WM266-4来源于单个淋巴结转移。WM115细胞系是N-RAS、c-KIT和CDK4基因的野生型。当注射到免疫功能受损的小鼠体内时，WM115细胞会产生异种移植物肿瘤。
细胞信息
- 细胞名称：WM-115（人恶性黑色素瘤细胞）(STR鉴定正确)
- 细胞别称：WM-115;WM 115;WM115F;WM115-mel;WM115mel;WC00079
- 种属：人
- 形态特性：成纤维细胞样
- 生长特性：贴壁生长
- 组织来源：恶性黑色素瘤；皮肤；源自转移部位：淋巴系统
- 细胞类型：肿瘤细胞
- 肿瘤类型：黑色素瘤细胞
培养条件
- 培养基：DMEM+10% FBS +1% P/S
- 培养温度：37℃
- 气体环境：95%空气，5%CO₂。
- 培养箱湿度：70% - 80%。
- 传代比例：1:2-1:4
- 换液频次：2-3次/周
细胞操作
提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，2000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。
1.当细胞汇合度达 80%，即可进行传代培养。
2.弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3.加 1-2 mL消化液（0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温或者37 ℃消化 1-2 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，2000 rpm 离心5 min弃去上清液。
4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2-1:4 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。
