细胞背景
RBE细胞是一株人肝胆管癌细胞；RBE细胞可能可产CEA和CA19-9。
细胞信息
- 细胞名称：RBE（人肝胆管癌细胞）(STR鉴定正确)
- 种属：人
- 形态特性：上皮样细胞
- 生长特性：贴壁细胞
- 细胞类型：肿瘤细胞
- 组织来源：肝
- 肿瘤类型：胆管癌细胞
培养条件
- 培养基：PRMI-1640 ＋10% FBS＋1% P/S
- 培养温度：37℃
- 气体环境：95%空气，5%CO₂。
- 培养箱湿度：70% - 80%。
- 传代比例：1:2-1:3
- 换液频次：2-3次/周
- STR:Amelogenin：X,X；CSF1PO：12,12；D12S391：18,18；D13S317：9,9；D16S539：10,11；D18S51：13,15；D19S433：14,15.2；D21S11：29,29；D2S1338：17,24；D3S1358：14,15；D5S818：11,12；D6S1043：14,14；D7S820：8,11；D8S1179：13,14；FGA：19,24；Penta E：18,18；TH01：6,6；TPOX：8,8；vWA：20,20；
细胞操作
提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，2000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。
1.当细胞汇合度达 80%，即可进行传代培养。
2.弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3.加 1-2 mL消化液（0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温或者37 ℃消化 1-2 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，2000 rpm 离心5 min弃去上清液。
4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2-1:3的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。
