Y1HGold菌株是GAL4-AbA酵母单杂系统用菌株，MATα型，可直接转化质粒进行筛库试验。Transformation marker为：ura3，leu2；报告基因为：AbAr。Y1HGold-GAL4-AbA 酵母单杂系统需要两种质粒配套使用：pAbAi 和PGADT7。质粒pAbAi的筛选标志为URA，用于表达 pBait-AbAi construct (1~3个bait DNA序列重复串联后克隆到pAbAi中)；质粒pGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白 (Prey)的融合蛋白。GAL4-AbA酵母单杂系统原理：Aureobasidin A (AbA)是一种环酯肽抗生素，在低浓度 (0.1-0.2 µg/ml)下即可对酵母产生毒性。基因组中整合了pBait-AbAi 的酵母菌株 (Bait-Reporter Yeast Strains)，当猎物蛋白 (Prey)结合到诱饵序列 (Bait DNA)上，GAL4 AD就会激活AbAr的表达，从而能够在含有抗生素AbA 的培养基上生长。AbAr与营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点，可以降低酵母单杂假阳性发生的概率。Y1HGold感受态细胞经pGADT7质粒（7988bp，AmpR）检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1

1. Carrier DNA 的预处理：将Carrier DNA 插入95℃金属浴5 min或插入浮漂中95℃水浴5min，加热后快速插入冰中。
2. 取100 µl冰上融化的Y1HGold感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，预处理后的Carrier DNA 10 µl，PEG/LiAc 640 µl并吸打几次混匀，30℃水浴摇床60min。
3. 将管放42℃水浴17 min，冰浴5min，5000rmp离心5min。
4. 弃上清，加1ml YPD重悬，30°C恒温摇床1h。
5. 5000rmp离心5min去上清，1ml无菌水洗2次，离心去上清。
6. 加100ul无菌水重悬，涂相应缺陷型平板。30℃培养3-4天。