EGY48 是酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）MATα 单倍体菌株，专为 LexA 异源系统酵母双杂交设计，核心用于核内可溶性蛋白互作的筛选与验证，以 LEU2 为主要营养报告基因，可搭配 lacZ 显色报告实现双重确证。Transformation marker为：his3、trp1、ura3。报告基因为：LEU2；报告基因UAS (上游激活序列)来源于LexA op(x6)，只有当 Bait和 Prey互作时才能启动 LEU2的表达。EGY48感受态细胞经pGBKT7质粒（7303bp，KanR）检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

基因型：

MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2

1. Carrier DNA 的预处理：将Carrier DNA 插入95℃金属浴5 min或插入浮漂中95℃水浴5min，加热后快速插入冰中。
2. 取100 µl冰上融化的EGY48感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，预处理后的Carrier DNA 10 µl，PEG/LiAc 640 µl并吸打几次混匀，30℃水浴摇床60min。
3. 将管放42℃水浴17 min，冰浴5min，5000rmp离心5min。
4. 弃上清，加1ml YPD重悬，30°C恒温摇床1h。
5. 5000rmp离心5min去上清，1ml无菌水洗2次，离心去上清。
6. 加100ul无菌水重悬，涂相应缺陷型平板。30℃培养3-4天。