AH109是由 Clontech公司开发，基于酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的 MATa 型菌株，是GAL4系统酵母双杂交实验的经典菌株，源自 PJ69-2A 并新增 lacZ 报告基因，常与 MATα 型的 Y187 菌株配对 mating 进行蛋白互作筛选 / 验证。Transformation marker为：trp1、leu2。报告基因为：lacZ，HIS3，ADE2，MEL1。AH109-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：pGBKT7和pGADT7。质粒pGBKT7的筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒pGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD与目标蛋白 (Prey)的融合蛋白。AH109有四个报告基因：lacZ、HIS3、ADE2、MEL1。AH109感受态细胞经pGADT7质粒（7988bp，AmpR）检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

基因型：

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3, MEL1 GAL2UAS- GAL2TATA-ADE2, URA3::MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ

1. Carrier DNA 的预处理：将Carrier DNA 插入95℃金属浴5 min或插入浮漂中95℃水浴5min，加热后快速插入冰中。
2. 取100 µl冰上融化的AH109感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，预处理后的Carrier DNA 10 µl，PEG/LiAc 640 µl并吸打几次混匀，30℃水浴摇床60min。
3. 将管放42℃水浴17 min，冰浴5min，5000rmp离心5min。
4. 弃上清，加1ml YPD重悬，30°C恒温摇床1h。
5. 5000rmp离心5min去上清，1ml无菌水洗2次，离心去上清。

加100ul无菌水重悬，涂相应缺陷型平板。30℃培养3-4天。