细胞信息

• 细胞名称：中国仓鼠卵巢细胞 K1（CHO - K1），是源自成年中国仓鼠卵巢深入活体组织切片的 CHO 细胞的亚克隆。
• 形态特性：上皮样细胞，通常呈长梭形或上皮细胞样形态。
• 生长特性：贴壁生长，但也可经过驯化实现悬浮生长。

培养条件

• 培养基：常用 F12：Ham's F12 Nutrient Mixture 培养基或 DMEM/F12 培养基，添加 10% 的胎牛血清（FBS），也可根据需要添加 1% 的青霉素-链霉素（P/S）以防止细菌污染。
• 培养温度：37℃。
• 气体环境：95%空气，5%CO₂。
• 培养箱湿度：70% - 80%。

细胞操作

• 复苏：

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，1000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。

• 传代：

1.当细胞汇合度达 80%-90%，即可进行传代培养。

2.弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。

3.加 1-2 mL消化液（0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温或者37 ℃消化 1-2 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，1000 rpm 离心5 min弃去上清液。

4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。