细胞基本信息
- 细胞名称：HEK293T 细胞，又称人胚肾 293T 细胞
- 细胞别称：Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo
- 种属来源：人
- 组织来源：源自人胚胎肾细胞
- 细胞背景：HEK293T 细胞是 HEK-293 细胞株插入了 SV40 T-antigen 的温度敏感基因形成的高转衍生株。
细胞特性
- 生长特性：贴壁生长
- 形态：上皮细胞样
- 功能特性：能够复制携带 SV40 复制区的载体。常用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白质生产等，转染效率高，用磷酸钙、PEI 或脂质体转染效率可达 90% 以上。
STR位点：Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:12,14；D16S539:9,13；D18S51:17,18；D21S11:28,30.2；D3S1358:15,16,17；D5S818:8,9；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:23；PentaD:9,10；PentaE:7,15；TH01:7,9.3；TPOX:11；VWA:16,19
培养条件
- 培养基：DMEM 培养基 + 10% 胎牛血清（FBS）+1% 青霉素-链霉素（P/S）
- 培养环境：空气 95%，二氧化碳（CO2）5%，温度 37℃
- 换液频率：一般2-3 天换液一次，也可根据细胞生长密度调整换液次数
细胞操作
提前取出1支Biorabbit™细胞洗涤液和1支Biorabbit™细胞复苏液，放在37℃水浴锅或者培养箱中溶解。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻，随后加入到含 5mlBiorabbit™洗涤液的无菌管中，轻轻充分混匀，此过程避免气泡。将离心管置于水平离心机中，1000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6mlBiorabbit™复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将5-6ml单细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。
1.当细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
2.弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3.加 1-2mL 消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温消化 0.5-1min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，1000rpm 离心5min弃去上清液。
4.按 5-6mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。
