细胞信息
- 细胞名称:LX-2 (人肝星形细胞) (STR鉴定正确)
- 细胞别称:Lieming Xu-2
- 种属:人
- 形态特性:上皮样细胞
- 生长特性:贴壁生长
培养条件
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 培养温度:37℃。
- 气体环境:95%空气,5%CO₂。
- 培养箱湿度:70% - 80%。
- 传代比例:1:2-1:4
- 换液频次:2-3次/周
STR位点:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D1S1656:12;D2S441:11,14;D2S1338:17;D3S1358:13,15;D5S818:11,12;D7S820:11;D8S1179:13;D10S1248:13;D12S391:15,17;D13S317:11,13;D16S539 :13;D18S51:12;D19S433:13,15.2;D21S11:28,31;D22S1045:16;DYS391:10;FGA:21,26;Penta D:12,13,15;Penta E:5,21;TH01:9.3;TPOX:8,9;vWA:17
细胞操作
提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液,放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出,迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中,轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中,2000rpm 离心5分钟,弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液,用滴管轻轻吹打成单细胞悬液,避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。
1.当细胞汇合度达 80-90%,即可进行传代培养。
2.弃去旧培养基,用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3.加 1-2 mL消化液(0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA)于培养瓶中,常温或者37 ℃消化 1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,轻轻吹打成单细胞悬液,2000 rpm 离心5 min弃去上清液。
4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按 1:2 到 1:4的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。