细胞背景
MC38细胞源自C57BL/6小鼠的结肠腺癌细胞系是广泛用于结直肠癌研究的小鼠模型。该细胞系展现出高突变率,特别是在mutanome(突变谱)和neoantigen(新抗原)表达方面,使它们对免疫检查点抑制剂疗法高度敏感。它们对内源性CD8+ T细胞攻击新抗原的反应性突显了它们在研究肿瘤环境中免疫相互作用中的价值,定位MC38模型为关键的免疫反应性小鼠肿瘤模型。MC38细胞在同源C57BL6小鼠宿主或免疫缺陷小鼠中形成肿瘤和转移。特别是在正位小鼠模型中使用的MC38结肠腺癌模型,因其免疫反应性而受到认可,使其成为评估免疫疗法的有效平台,包括放射疗法、检查点抑制剂和其他新型治疗方法。MC38细胞表达诸如claudin-1和SATB2等结肠标志物,这对于研究结直肠腺癌的基因组和表观基因组基础以及识别潜在治疗方法至关重要。MC38异种移植模型的免疫学特性使其成为癌症研究的多功能工具,尤其是在结直肠腺癌的背景下。MC38结肠腺癌模型,凭借其高mutanome和neoantigen负荷,作为一个典型的免疫反应性小鼠模型,促进了结直肠肿瘤细胞系与宿主免疫系统之间复杂动态关系的探索。
细胞信息
- 细胞名称:MC38(小鼠结肠癌细胞)(STR鉴定正确)
- 种属:小鼠C57BL/6
- 形态特性:上皮样细胞
- 生长特性:贴壁生长,少量悬浮
- 组织来源:结肠
- 肿瘤类型:结肠细胞癌
培养条件:
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 培养温度:37℃。
- 气体环境:95%空气,5%CO₂。
- 培养箱湿度:70% - 80%。
- 传代比例:1:2-1:4
- 换液频次:2-3次/周
细胞操作
提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液,放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出,迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中,轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中,2000rpm 离心5分钟,弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液,用滴管轻轻吹打成单细胞悬液,避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。
1.当细胞汇合度达 80%,即可进行传代培养。
2.弃去旧培养基,用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3.加 1-2 mL消化液(0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA)于培养瓶中,常温或者37 ℃消化 1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,轻轻吹打成单细胞悬液,2000 rpm 离心5 min弃去上清液。
4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按 1:2-1:4 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。