细胞背景：

J774A.1细胞来源于BABL/cN小鼠，有抗体依赖的吞噬作用，生长受硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制；J774A.1细胞可产生IL-1β和大量的溶菌酶。

细胞信息

• 细胞名称：J774A.1（小鼠单核巨噬细胞）(STR鉴定正确)
• 种属：小鼠
• 形态特性：单核细胞，巨噬细胞样
• 生长特性：贴壁生长，少量悬浮
• 细胞来源：巨噬细胞
• 细胞类型：肿瘤细胞
• 肿瘤类型：肉瘤细胞

培养条件

• 培养基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S
• 培养温度：37℃。
• 气体环境：95%空气，5%CO₂。
• 培养箱湿度：70% - 80%。
• 传代比例：1:2
• 换液频次：2-3次/周

细胞操作

• 细胞复苏：

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，2000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。

• 细胞传代：

1. 此细胞为贴壁细胞，少量悬浮。
2. 细胞培养时，需每天将细胞吹打下来，使细胞重新贴壁生长。
3. 传代时可不使用胰酶消化，将细胞吹打至培养基中，将培养基一分为二到两个培养瓶中即可。