细胞背景

NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原（CEA）和TAG72，并且没有左旋多巴胺脱羧酶（DDC）活性。NCI-N87细胞的血管活性的肠肽（VIP）受体活性极低并缺乏胃泌激素受体，它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明，NCI-N87细胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受体基因的重组。NCI-N87细胞表达的c-myc和c-erb-B2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因NCI-N87细胞不表达：N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌激素释放肽。据报道，NCI-N87细胞的植板率为4.3%。

细胞信息

• 细胞名称：NCI-N87（人胃腺癌细胞） (STR鉴定正确)
• 细胞别称：NCI-N87
• 种属：人
• 形态特性：上皮样细胞
• 生长特性：贴壁生长
• 组织来源：胃癌，来源于转移部位：肝
• 细胞类型：肿瘤细胞
• 肿瘤类型：胃癌细胞

培养条件

• 培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
• 培养温度：37℃。
• 气体环境：95%空气，5%CO₂。
• 培养箱湿度：70% - 80%。
• 传代比例：1:2-1:3
• 换液频次：2-3次/周
• STR: Amelogenin：X，Y；CSF1PO：8,12；D13S317：8,11；D16S539：9，13；D18S51：17；D19S433：14,14.2；D21S11：30；D2S1338：23，24；D3S1358：14；D5S818：12,13；D7S820：10,11；D8S1179：14；FGA：20,21；TH01：9；TPOX：9,11；vWA：15，16；

细胞操作

• 细胞复苏：

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，2000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。

• 细胞传代：

1.当细胞汇合度达 80%，即可进行传代培养。

2.弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。

3.加 1-2 mL消化液（0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温或者37 ℃消化 1-2 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，2000 rpm 离心5 min弃去上清液。

4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:3-1:6 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。