细胞背景

293 [HEK-293]细胞是剪切过的人腺病毒5（Ad5）转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞，293 [HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出，293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5（Ad5）基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体（19q13.2）。293 [HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主，可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。

细胞信息

• 细胞名称：HEK293 [HEK-293T](人胚肾细胞) (STR鉴定正确)
• 细胞别称：Hek293;HEK-293;HEK 293;HEK:293;293;293 HEK;

Human Embryonic Kidney 293

• 种属：人
• 形态特性：上皮样细胞。
• 生长特性：贴壁生长

培养条件

• 培养基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S 
• 培养温度：37℃。
• 气体环境：95%空气，5%CO₂。
• 培养箱湿度：70% - 80%。
• 传代比例：1:3-1:6
• 换液频次：2-3次/周

细胞操作

• 细胞复苏：

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，2000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。

• 细胞传代：

1. 当细胞汇合度达 80-90%，即可进行传代培养。
2. 弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。
3. 加 1-2 mL消化液（0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温或者37 ℃消化 1-2 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，2000 rpm 离心5 min弃去上清液。
4. 按 5-6 mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。