细胞背景

U-2 OS细胞（原名2T）是由Ponten·J和Saksela·E在1964年从一名15岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤中分离建立的。U-2 OS细胞与WI-38细胞共培养或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的补体结合试验（CF法）未检测到病毒。U-2 OS细胞表达胰岛素样生长因子I、II (IGF-I、IGF-II)受体和骨肉瘤衍生生长因子（*ODGF）。

细胞信息

• 细胞名称：U2OS（人成骨肉瘤细胞）(STR鉴定正确)
• 细胞别称：U-2 OS;U-2OS;U-2-OS;U2-OS;U20-S;U20S;2T
• 种属：人
• 生长特性：贴壁生长
• 形态特性：上皮细胞样
• 组织来源：骨；骨肉瘤
• 细胞类型：肿瘤细胞
• 肿瘤类型：肉瘤细胞

培养条件

• 培养基：McCoy's 5A +10% FBS +1% P/S 
• 培养温度：37℃
• 气体环境：95%空气，5%CO₂。
• 培养箱湿度：70% - 80%。
• 传代比例：1:3-1:6
• 换液频次：2-3次/周
• STR:Amelogenin：X；CSF1PO：13；D13S317：13；D16S539：11，12；D18S51：10.2，12，14；D19S433：15；D21S11：31；D2S1338：20，24；D3S1358：16，18.3；D5S818：11；D7S820：11，12；D8S1179：12，14；FGA：20；TH01：6，9.3；TPOX：11，12；vWA：14，18；

细胞操作

• 细胞复苏：

提前取出1支细胞洗涤液和1支细胞复苏液，放在37℃水浴锅中解冻。将细胞冻存管从液氮中取出，迅速置于 37℃水浴中解冻。解冻后立即将细胞悬液转移到睿必特TM洗涤液管中，轻轻混匀。将离心管置于水平离心机中，2000rpm 离心5分钟，弃去上清。再加入5-6ml睿必特TM复苏液，用滴管轻轻吹打成单细胞悬液，避免气泡。将细胞悬液转移至T25细胞培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。

• 细胞传代：

1.当细胞汇合度达 80%，即可进行传代培养。

2.弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 轻轻润洗细胞 1-2 次。

3.加 1-2 mL消化液（0.25 % Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，常温或者37 ℃消化 1-2 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加 5 ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，轻轻吹打成单细胞悬液，2000 rpm 离心5 min弃去上清液。

4.按 5-6 mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2-1:4 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中。