本品为BL21-CodonPlus (DE3)-RIL（基因型：F–ompT hsdS(rB–mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [argU ileY leuW CamR]）BL21-CodonPlus(DE3)-RIL菌株来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解。BL21-CodonPlus(DE3)-RIL菌株含有pACYC质粒，补充大肠杆菌缺乏的3种稀有密码子 (AGA/AGG, AUA, CUA)对应的tRNA (argU, ileY, leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素抗性。pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>107 cfu/µg DNA。 

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒1-2ul，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；

2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；

3. 添加 900 μL睿必特TM E.coli快速复苏液 （或是不含抗性的 LB液体培养基），37℃摇床220 rpm培养60 min；

4.  5000 rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB平板上，37℃培养箱放置过夜。