BW25113电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。BW25113菌株来源于E. coli K-12 W1485，是K12的衍生菌株，与MG1655类似，也是一种经过较少改造，比较接近于“野生型”的大肠杆菌工程菌株。BW25113作为母系菌株，可以用来制作E. coli Keio Knockout 文库；同时可作为大肠杆菌模式菌株使用，用来制作各种基因的Knockout突变体。另外，BW25113可用于构建，扩繁质粒使用，不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液尽量去除核酸酶，以防提取的质粒被降解。BW25113电击感受态细胞经pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>109 cfu/μg DNA。
基因型
- , DE(araD-araB)567, lacZ4787(del)::rrnB-3, LAM-, rph-1, DE(rhaD-rhaB)568, hsdR514
- 取适量睿必特复苏液置37度预热1-2小时（每管感受态准备10ml复苏液）。
- 杀菌处理后的0.1 cm电击杯和杯盖插入冰中，压实冰面，电击杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。
- 取-80℃保存的电击感受态细胞插入冰中5 分钟，待其融化，加入目的DNA (质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。
（A）对于连接产物，部分公司的T4连接酶体系或重组体系可与电击感受态混合后电
击转化，无需进行DNA纯化，但 DNA浓度不能过高，DNA浓度不超过100 ng/μl，体积不超过1/10感受态。
（B）对离子浓度较高的DNA溶液或反应体系请用膜纯化或乙醇沉淀法纯化DNA，ddH2O溶解后电击转化。
- 用200 μl枪头(用刀切除0.5cm枪尖)将感受态-DNA混合物快速移到电击杯中（避免产生气泡），轻轻晃动使液面保持水平状态，盖上杯盖，插入冰中。
- 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV，将电击杯从冰中拿出，用吸水纸擦拭表面，吸干表面水渍，放入电转槽中，电击完成后拿出电转杯放室温，打开杯盖，15秒内加入0.9ml预热的睿必特复苏液（此步骤可在电转仪旁操作，无需在超净台操作），用1ml 枪吹吸电击杯底部2-3次，混匀后转移到50 ml离心管，向离心管中补加培养基至10 ml。37℃，250 rpm复苏60分钟。
- 5000 rpm 离心一分钟收菌，重悬后取100-200 μl涂布到含相应抗生素的平板上（因菌量较大，若全部涂板请选用培养皿2-5个）。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养13-17小时。
