产品基本信息
本品为大肠杆菌BL21(DE3)（基因型：F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)）制作的电击感受态细胞，只能用于电击转化，不能用于热激转化。BL21(DE3)为Lon蛋白酶和OmpT外膜蛋白酶缺陷菌株。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于BL21的染色体上，所以称为BL21(DE3)。BL21(DE3)菌株可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，可用于各种多肽，蛋白表达文库的构建。BL21(DE3)电击感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>1×1010 cfu/μg DNA。
存储条件
-80℃
使用方法
1.取适量LB放37度预热1-2小时（每管感受态准备10mlLB）。
2. 0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟沥干水分，正置5分钟，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电击杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。
3.取-80℃保存的电击感受态细胞插入冰中5分钟，待其融化，加入目的DNA (质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。
4.用200 ul枪头(用刀切除0.5cm枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中（避免产生气泡），轻轻晃动使液面保持水平状态，盖上杯盖，插入冰中。
5.启动电转仪，根据仪器要求设置参数，将电击杯从冰中拿出，用吸水纸擦拭表面，吸干表面水渍，放入电转槽中，电击完成后拿出电转杯放室温，打开杯盖，15秒内加入100ul预热的LB（此步骤可在电转仪旁操作，无需在超净台操作），用1ml枪吹吸电击杯底部2-3次，混匀后转移到50 ml离心管，向离心管中补加LB培养基至10 ml。37℃，220 rpm 复苏60分钟。
6.5000rpm离心一分钟收菌，留取100-200ul菌液重悬后涂布到含相应抗生素的平板上。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养12-16小时。
