基因型E. coli B F- ompT hsdS(rB-mB- ) dcm+Tetr gal λ(DE3) endA Hte.
BL21-Gold(DE3)菌株来源于Stratagene公司的BL21菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，减少对重组蛋白的降解。BL21-Gold(DE3)菌株的染色体中整合了一个有功能的Dcm甲基化酶，可以促进质粒的稳定，防止被自身的限制酶系统降解；引入了Hte基因，可以提高转化效率； 缺失核酸内切酶 (endA)，提高了质粒DNA的产量、质量和稳定性。另外该菌株与BL21(DE3)一样，染色体中也整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素抗性。BL21-Gold(DE3) 感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>5×108 cfu/µg DNA。

• 转化方法

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；

2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；

3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床200 rpm培养60 min；

4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板（若质粒浓度较高，需要稀释后涂板），37℃培养箱放置过夜。