本品为大肠杆菌TB1{基因型：F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (StrR)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR}制作的感受态。该菌株源于JM 83，是JM83 hsdR型菌株，只含有大肠杆菌RNA polymerase，缺少BL21(DE3)菌株的T7 RNApolymerase，适合NEB公司的pMAL系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use theE. coli RNA polymerase)，不能用于pET系列质粒的表达，具有链霉素抗性。TB1感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。

-80℃

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中 5 min，加入目的质粒 1-2ul，轻
弹使混合均匀，并在冰中孵育 30min；
2. 放 42℃水浴锅中热激 90 s，立即插入冰中静置 2-3 min；
3. 添加 900 μL 900 μL 睿必特
TM E.coli 快速复苏液 （或是不含抗性的 LB
液体培养基），37℃摇床 220 rpm 培养 60 min；
4. 5000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂
布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 平板上，37℃培养箱放置过夜。