本品为大肠杆菌BL21 (DE3)pLysS [基因型：F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3) pLysS CamR]制作的高效感受态。该菌整合了λ噬菌体DE3区（该区域含有T7噬菌体RNA聚合酶）；同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于PET、pGEX和pMAL等质粒的蛋白表达；菌株携带有pLysS质粒，具有氯霉素抗性，pLysS含有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽寡聚糖，溶解大肠杆菌，降低目的基因的背景表达，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白；pUC19 质粒检测转化效率>107 cfu/μg DNA。

-80℃

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中 5 min，加入目的质粒 1-2ul，轻
弹使混合均匀，并在冰中孵育 30min；
2. 放 42℃水浴锅中热激 90 s，立即插入冰中静置 2-3 min；
3. 添加 900 μL 900 μL 睿必特
TM E.coli 快速复苏液 （或是不含抗性的 LB
液体培养基），37℃摇床 220 rpm 培养 60 min；
4. 5000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂
布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 平板上，37℃培养箱放置过夜。