BLR(DE3) 是 BL21(DE3) 的 recA⁻衍生株，核心优势是稳定含重复序列/易重组的质粒，同时保留 T7 高效表达与蛋白酶缺陷特性。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，整合在大肠杆菌的染色体上），可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。BLR(DE3)菌株具有四环素抗性。BLR(DE3)感受态细胞由pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。

基因型

F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm (DE3) Δ(srl-recA)306::Tn10 (TetR) 

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中 5 min，加入目的质粒 1-2ul，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育 30min。
2. 放 42℃水浴锅中热激 90 s，立即插入冰中静置 2-3 min。
3. 添加900ul睿必特 TM E.coli 快速复苏液 （或不含抗性的 LB 液体培养基），37℃摇床 220 rpm 培养 60 min。
4. 5000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μ l 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 平板上，37℃培养箱放置过夜。