本品为大肠杆菌XL1-Blue MRF` Kan（基因型：Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F´ proAB lacIqZΔM15 Tn5 (KanR)]）制作的高效感受态，菌株来源于XL1-Blue株系，是限制酶系统缺失型[Δ(mcrA)183, Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173]，且具有卡那霉素抗性(KanR)，可转化具有氯霉素或四环素抗性的质粒。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。hsdR17突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失，增强了外源DNA的稳定性和提取质量。lacIqZΔM15的存在使XL1-Blue MRF’Kan菌株可用于蓝、白斑筛选。XL1-Blue MRF’Kan感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。

-80℃

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min； 2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min； 3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min； 4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。