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XL1-Blue 化学转化感受态细胞

货号 规格 纯度
EC034H-S 10×100 μL

产品基本信息

本品为大肠杆菌XL1-Blue(基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 (rk-,mk+), relA1 lac [F' proAB lacIqZΔM15: Tn10 (TetR)])制作的高效感受态,菌株能保证高拷贝质粒稳定复制,recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。hsdR17突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失,增强了外源DNA的稳定性和提取质量。lacIqZΔM15的存在使XL1-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素抗性。XL1-Blue感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>109 cfu/μg DNA。

存储条件

-80℃

转化方法

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min; 2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min; 3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min; 4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。

注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。 2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。 3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。