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Stbl4 化学转化感受态细胞

货号 规格 纯度
EC026H-S 10×100 μL

产品基本信息

本品为大肠杆菌Stbl4[基因型:F′ proAB+ lacIqZ∆M15 Tn10 (TetR)mcrA ∆(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 gal- thi-1 supE44 λ relA1∆(lac-proAB)]制作的高效感受态。该菌来源于大肠杆菌Stbl2,可用于慢病毒载体或逆转录病毒载体的构建。Stbl4菌株适合克隆不稳定插入片段 (正向重复序列,逆转录病毒序列等);mcrA 突变和mcrBC-hsd RMS-mrr deletion 使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列。recA 1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。lacIqZΔM15标记使得Stbl4菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素抗性。唯地生物生产的Stbl4感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>108 cfu/μg DNA。

存储条件

-80℃

使用方法

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min; 2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min; 3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min(质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概); 4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜(质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概)。

注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。 2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。