睿必特生物无血清细胞冻存液（增强型）适用于常用哺乳动物细胞系的冷冻保存，尤其适用于原代细胞、干细胞等的冷冻保存。该冻存液含10%DMSO，添加了蛋白质冷冻保护剂。

1. 准备待冻存细胞：

选择健康、无污染且处于对数期的细胞最佳，并计数细胞数量。贴壁细胞消化后计数，然后约180 g缓慢离心5-10 min去除培养基，获取细胞沉淀；悬浮细胞约180 g 离心后去除培养基。

2. 细胞冻存：

1. 确定冻存密度和体积：可使用的冻存密度为1-10×106/ mL，推荐冻存密度为2-5×106/ mL。冻存体积为0.5-1 mL/管。
2. 细胞重悬：吸取适量已4℃预冷的冻存液重悬细胞，重悬后应立即分装至细胞冻存管中。
3. 快速冻存：经冻存液重悬后的细胞应立即移入-80℃冰箱，无需程序降温。如果无法立即移入，可暂时存放于4℃或-20℃冰箱，但不超过10 min。
4. 长期储存：在-80℃冰箱过夜后的冻存管，可移入液氮罐中长期保存。若短期使用，可在-80℃冰箱中保存数月，具体保存时间和效果因细胞类型而异。

3. 细胞复苏：

1. 先准备体积为冻存液体积9倍的完全培养基，预温至室温或37℃。
2. 取出液氮或-80℃中的冻存管，置于37℃水浴并不断轻摇。待剩余1粒米大小的冰块时，迅速移出水浴。

将冻存液立即吸取至完全培养基中，轻柔吹打3-5次混匀。然后，约180 g离心5-10 min，获得细胞沉淀备用。