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Ar.Qual 化学转化感受态细胞

货号 规格
AT017-H-M 50×100 μL 价格:1440元

产品基本信息

本品为发根农杆菌Ar.Qual(基因型:Agrobacterium rhizogenes (strR,CamR ) Ar Qual Ri (agropine type))发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.Qual发根农杆菌菌株含有农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(玉米,烟草,番茄,柑橘等),同时具有链霉素,氯霉素抗性。本公司生产的Ar.Qual化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(12739bp,KanR)检测转化效率>104 cfu/μg DNA。 

存储条件

-80°

使用方法

1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。

2. 每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手拨打管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。

3. 加入900 μl无抗生素YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天。

注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 利福平使用浓度<25 μg/ml,庆大霉素使用浓度<50 μg/ml。过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率;Ti质粒丢失概率极低,可不用庆大霉素,以提高转基因效率。