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Ar.1193 化学转化感受态细胞

货号 规格
AT016-H-S 10×100 μL 价格:340元

产品基本信息

本品为发根农杆菌(基因型:Agrobacterium rhizogenes (carbR,strR,rifR ) pRi1193 (agropine type))制作的高效感受态,发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.1193发根农杆菌含有pRi1193农杆碱型Ri质粒,特别适合豆科,茄科植物毛状根的诱导,同时具有羧苄青霉素,链霉素,利福平抗性。本公司生产的Ar.1193化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(12739bp,KanR)检测转化效率>104 cfu/μg DNA。 

存储条件

-80°

使用方法

. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒(约500 ng),轻弹使混合均匀;

2. 冰中孵育5 min,液氮中放置5 min,放37℃水浴锅中热激5 min,立即插入冰中静置5 min;

3. 添加900 μL睿必特TM E.coli快速复苏液  28℃摇床220 rpm培养2-3 h;

4. 5000 rpm离心,倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,28℃培养箱放置2-3天。

注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 利福平使用浓度<25 μg/ml,庆大霉素使用浓度<50 μg/ml。过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率;Ti质粒丢失概率极低,可不用庆大霉素,以提高转基因效率。