C41(DE3)菌株起源于BL21(DE3)，其优点是可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。 C41(DE3)跟BL21(DE3)的区别在于其基因组含有至少一个未知突变，这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白的能力，此突变位点参与大肠杆菌表达毒性蛋白时的细胞死亡途径；正是这个未知突变使其获得了更广泛的表达毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。此菌株含有DE3区，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。 C41(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>2×108 cfu/μg DNA。 

• 1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5min，加入目的质粒1-2ul，轻 弹使混合均 匀，并在冰中孵育30min；
• 2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
• 3. 添加900 μL 900 μL睿必特TM E.coli快速复苏液 （或是不含抗性的 LB 液体培养基 ），37℃摇床220 rpm培养60 min；

4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂 布到含相应抗 生素的2YT或LB平板上，37℃培养箱放置过夜。