C41(DE3)菌株起源于BL21(DE3)，其优点是可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。 C41(DE3)和BL21(DE3)的区别在于其基因组含有至少一个未知突变，这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白的能力，此突变位点参与大肠杆菌表达毒性蛋白时的细胞死亡途径；正是这个未知突变使其获得了更广泛的表达毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。此菌株含有DE3区，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。 C41(DE3)感受态细胞由pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>107 cfu/μg DNA。

基因型

F–ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中 5 min，加入目的质粒 1-2ul，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育 30min。
2. 放 42℃水浴锅中热激 90 s，立即插入冰中静置 2-3 min。
3. 添加900ul睿必特 TM E.coli 快速复苏液 （或不含抗性的 LB 液体培养基），37℃摇床 220 rpm 培养 60 min。
4. 5000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μ l 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 平板上，37℃培养箱放置过夜。