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Fast-T1 化学转化感受态细胞

货号 规格
AT011-H-M 50×100 μL 价格:1530元

产品基本信息

Fast-T1  感受态细胞(Fast-T1 competent cells)是一种常用于分子克隆和基因工 程实验的高效感受态细胞。感受态细胞是指经过特殊处理后,能够更容易吸收外 源 DNA(如质粒)的细菌细胞。Fast-T1  感受态细胞以其高转化效率和快速生 长特性而闻名,适用于多种分子生物学实验。该感受态细胞在 37 °C  下生长迅 速,通常在过夜培养后即可获得大量转化子。该细胞通常携带 \(lacZ\alpha\)  基 因片段,可与含有 \(lacZ\)  互补片段的质粒(如 pUC  系列)配合使用,通过蓝 白斑筛选鉴定阳性克隆。该感受态细胞通常具有抗生素抗性(如氨苄青霉素抗  性),便于筛选含有相应抗性基因的转化子。Fast-T1  感受态细胞的特点:
Fast-T1  感受态细胞经过优化处理,能够高效吸收外源 DNA ,转化效率通常可 达 \(10^8 \sim 10^9 \, \text{cfu/ μg DNA}\) ,适合克隆低拷贝数或复杂质粒。

存储条件

-80°

使用方法

1.  从-80  ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中 5 min,加入目的质粒 1-2ul,轻弹 使混合均匀,并在冰中孵育30min;

2.  放 42℃水浴锅中热激 90 s ,立即插入冰中静置 2-3 min;

3.  添加 900   μL 睿必特 TM E.coli 快速复苏液 (或是不含抗性的 LB 液体培养 基),37℃摇床 220 rpm 培养 60 min;

4.    5000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布 到含相应抗生素的 2YT 或 LB 平板上,37℃培养箱放置过夜。

注意事项

1.  感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2.  不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3.  诱导蛋白表达时,IPTG  浓度可选(0.1-2 mM  均可)。