产品基本信息
本品为农杆菌GV3101(基因型:C58 (rifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR) Nopaline)制作的感受态,菌株为 C58 型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pMP90(pTiC58DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pMP90(pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pMP90 (pTiC58DT-DNA)型Ti 质粒含有筛选标签:gent,赋予GV3101菌株庆大霉素抗性,适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。本公司生产的 GV3101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(12739bp,KanR)检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
存储条件
-80℃
使用方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒(约500 ng),轻弹使混合均匀;
2. 冰中孵育5 min,液氮中放置5 min,放37℃水浴锅中热激5 min,立即插入冰中静置5 min;
3. 添加900 μL YEB液体培养基,28℃摇床220 rpm培养2-3 h;
4. 5000 rpm离心,倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,28℃培养箱放置2-3天。